您好、欢迎来到现金彩票网!
当前位置:秒速飞艇登录 > 所有标签显示 >

植物基因功能研究中蛋白标签用对了吗?否则可能影响您的结果。

发布时间:2019-08-09 04:58 来源:未知 编辑:admin

  在研究植物蛋白质功能的过程中,利用免疫学技术研究蛋白质之间以及蛋白质与核酸之间的相互作用是常用手段。针对目标蛋白的特异抗体必不可少。然而,并不是所有的蛋白都有合适的抗体可用,或者制备特异的抗体过程可能会较长或者成本较高。因此,研究人员通常将特定的抗体表面抗原蛋白标签与所研究的蛋白融合成标签蛋白,以方便利用成熟商用抗体进行试验。目前这样的常用抗原标签有C-MYC、HA、FLAG、GFP、GST、6His等等。人们通常默认小的抗原标签不会对蛋白的性质产生影响。

  受体类蛋白激酶(RLK),是植物中的最大的蛋白家族,能够参与多种细胞外信号的响应。RLK功能在多种生物学过程中具有功能,如感受病原菌侵染,调节共生菌互作,或者将细胞外的激素或小肽信号传递到细胞内以及感受细胞壁的状态等等。然而,虽然RLK的功能强大、作用范围广泛,但是在研究其功能过程中,几乎没有抗体可用。因此研究人员通常会选择将小的抗原标签或者GFP融合到RLK蛋白上来进行生化分析,如immunoblot,亚细胞定位等研究。

  FLS2是细菌鞭毛蛋白的受体,是受体激酶研究的模式系统。过去的研究通常利用融合在FLS2的C末端的标签来研究FLS2的功能。然而,在本研究中研究人员发现在fls2突变体中利用不同的融合C末端标签的FLS2融合基因互补突变体,结果显示,不同的C末端标签可以导致FLS2的下游信号存在显著差异。并且四种标签中只有一种标签可以维持flg22处理后抑制植物生长的表型。而野生型和使用非标签蛋白的植株则没有这个问题。这表明,目前的FLS2的某些细微功能,更甚至,进一步扩展到其他RLK的的功能研究中,由于使用了抗原标签而导致许多功能可能被忽视或者不正确的解读。

  这些结果警示我们:必需仔细考虑抗原标签融合蛋白在蛋白质的生化性质研究过程中的适用性和可靠性问题,以及结果的准确性问题。

http://southoverschool.net/suoyoubiaoqianxianshi/646.html
锟斤拷锟斤拷锟斤拷QQ微锟斤拷锟斤拷锟斤拷锟斤拷锟斤拷锟斤拷微锟斤拷
关于我们|联系我们|版权声明|网站地图|
Copyright © 2002-2019 现金彩票 版权所有